Выявление технологически значимых денатурирующих воздействий по уровню олигомеризации и фрагментирования фракций, обогащенных IgG и альбуминами

Дата изготовления: май 2020 года. 

Цель: изучить влияние дезинфектанта, обладающего вироцидно-бактерицидным механизмом действия на гамма-глобулиновую и альбуминовую фракцию, полученную из плазмы КРС.

Задачи:

1.Получить  фракции плазмы крови, обогащенные иммуноглобулином и альбумином.

2.Изучить влияние различных концентраций фенола и тритона Х-100 на показатели мутности в растворах образцов гамма-глобулиновой и альбуминовой фракций плазмы.

3.Обработать полученные фракции растворами с различными концентрациями фенола и тритона Х-100 и изучить их влияние на биохимические показатели.

4.Изучить белковый спектр полученных фракций.

Есть приложения.

Список сокращений…………………………………………………………..…….3

ВВЕДЕНИЕ………………………………………………………………………....4

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ……………………………………………..….8

1.1 Общая характеристика иммуноглобулина G……………………….…….….8

1.2  Альбумин.Структура,свойства,функции…………………..………..……....14

1.3  Инфекционная безопасность плазмы крови ……………………………..…19

1.4  Применение фенола в качестве дезинфиктанта ………..…………...………24

1.5 Фракционирование белков сульфатом аммония ……………….…….……. .28

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ…………………  ……..………...……..32

2.1. Материалы……………………………………………………………......……33

2.2. Приборы и дорогостоящая исследовательская техника…………………….33

2.3. Методы исследования…………………………………………………………34

2.3.1. Получение полуфабрикатов………………………...………………....……34

2.3.2. Определение концентрации белка………………………………………….34

2.3.3. Определение цветности и мутности раствора……………………………..34

2.3.4. Установление заданного рН……………………………………………….. 34

2.3.5. Диск-электрофорез…………………………………..………………………34

2.3.6. Эксклюзионная хроматография…………………….………………………35

2.3.7. Микробиологический анализ………………………………………...……..35

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ……………………………………37

3.1Получение гамма-глобулинового и альбуминового полуфабриката………..38

3.2 Влияние дезинфектанта гидрофобной природы и неионного детергента на белки гидрофобной природы (иммуноглобулин)………………………………..42

3.3 Влияние дезинфектанта гидрофобной природы и неионного детергента на белки гидрофобной природы (альбумин)……………………………….……….46

3.4Микробиологический анализ образцов ……………………………………….50

ВЫВОДЫ…………………………………………………………………………...51

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ………………………………………………………….52

ПРИЛОЖЕНИЯ…………………………………………………………………….58

1. Большой энциклопедический словарь медицинских териминов / под ред. Э.  Г. Улумбекова. – Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2012. – 2263 с.

2. ГОСТ 9097-82 Аммоний сернокислый (Сульфат аммония).

3. Глинн П. Структура и функции антител / Стюард М. – М: Мир, 1983. –С.268.

4. Дирихс А., Кубичка Р. Фенолы и основания из углей. Пер. с чешск. Под ред. С.Д.Федосеева. М., Гостоптехиздат, 1958, 468 с.

5. Джафаров Э.С., Алиев Л.А. Структура и конформационные особенности сывороточного альбумина. – Баку: Элм,1990. -240с

6. Жибурт Е.Б. Правила переливания плазмы. М.: 2008; 18—9.

7. Зубкова Н.В Обеспечение инфекционной безопасности препаратов из плазмы крови доноров. Гланц С. Медико-биологическая статистика. М.: Практика; 1998.

8. Захарова Г. Упоров И. Пероксидаза из корней хрена: модулирование свойств химической модификацией белковой глобулы и гема - 2011.

9. Иммунодиффузия в геле: 0ФС.1.8.2.0001.15. Государственная фармакопея Российской Федерации. XIII издание. Том II.

10. Иммуноглобулины./ Г. Литмен, под ред. Р. Гуда. М. – 1981 – 189 с.

11. Кравчук, Ю.И. Краснов,В.Н. Малинин. Среда обитания // Глобальный экологический кризис: мифы и реальность. 2005.- 2с.

12. Кульберг А. Я. Молекулярная иммунология. Учеб. пособ. – М.: Высш. шк. – 1985. – 287с.

13. Кудашева Э.Ю. Современные технологические подходы к обеспечению вирусной безопасности препаратов иммуноглобулинов человека / Э.Ю. Кудашева, И.В. Борисевич и др. // Успехи современного естествознания. – 2015. - №5. – с. 132-138.

14. Мостовская Е.В. Оптимизация технологии получения жидкой формы иммуноглобулина для внутривенного введения. Автореф. дисс. канд. биол. наук. Уфа, 2004. – С.146.

15. Панов В. П. Принципы обеспечения вирусной безопасности продуктов крови (обзор) / В. П. Панов // Химико-фармацевтический журнал. – 2004. - T.38. -№3. - С. 39-47.

16. Принципы обеспечения вирусной безопасности продуктов крови / В.П. Панов// Химико-фармацевтический журнал. – 2004.– т.38. – №3.–С.39-47.

17. Ройт А. Иммунология / А. Ройт, Дж. Бростофф, Д. Мейл // Пер. с англ. – М.: Мир. – 2000. – 592 с.

18. Скоупс Р.К. Методы очистки белков / Р.К. Скоупс – М.: Мир, 1985

19. Современные технологические подходы к обеспечению вирусной безопасности препаратов иммуноглобулинов человека / Э.Ю. Кудашева, И.В. Борисевич, В.Б. Иванов // Успехи современного естествознания. – 2015. – № 5. – С. 132-138.

20. Справочник биохимика: Пер. с англ./ Досон Р., Эллиот Д., Эллиот У., Джонс К. –М.: Мир. – 1991. – С.544,464.

21. Теоретический риск передачи вирусов с ферментами // Безопасность лекарственных средств и фармаконадзор. – 2012. – №1.

22. Фазовое расслоение в растворах неионного поверхностно-активного вещества Тритон Х-100 в присутствии фенола / В.А. Дорощук, Н.А. Гонта, С.А. Куличенко//Киевский национальный университет им. Тараса Шевченко. – 2008. – С.21-27.

23. Физико-химические методы исследования биополимеров и низкомолекулярных биорегуляторов / В. Л. Воейков, П. Д. Решетов, И. Р. Набиев [и др.]. – Москва: Наука, 1992. – 406 с.

24. Храмов В.А., Барсуков А.К. ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА ПОДКЛАССОВ IgG БЫКА (BOS TAURUS) -2007.-с 3-4.

25. Харлампович Г.Д., Чуркин Ю.В. «Фенолы».– М., «Химия», 1974, 376 с.

26. Худяков, А. А. Эффективная дезинфекция и подбор дезинфектанта / А. А. Худяков // Ветеринария Кубани. – 2011. - №5.

27. Чечеткин А.В. Влияние инактивации патогенов на качество и показатели биологической полноценности компонентов донорской крови / А.В. Чечеткин, А.Д. Касьянов, В.Е. Солдатенков, А.Б. Макеев // Medline. – 2015. – Т. 16. – СТ. 72. – с. 779-790.

28. 28.Чечеткин А.В. Предупреждение инфицирования ВИЧ при переливании донорской крови и ее компонентов / А.В. Чечеткин, А.Б. Макеев, В.Е. Солдатенков, и др. // ВИЧ-инфекция и иммуносупрессии.– 2014. – № 4. – С. 64-68.

29. Яворская Е.С. Современные направления в мембранной нанофильтрации биофармпрепаратов. Часть 2. Удаление бактериальных эндотоксинов, мембранная ионообменная и аффинная хроматография. Мембраны для контроля вирусов в воде / Мембраны. – 2007. – № 2(34). – с. 34–41.

30. Ali Jahanban-Esfahlan , Alireza Ostadrahimi , Rana Jahanban-Esfahlan , Leila Roufegarinejad , Mahnaz Tabibiazar , Ryszard Amarowicz Recent Developments in the Detection of Bovine Serum Albumin // - 2019 Jul 15.- № 138.60

31. Aleksandar Denic, Moses Rodriguez Polyclonal and Monoclonal Antibodies in Clinic Bharath Wootla // Affiliations expand. 24037837 DOI: 10.1007/978-1-62703-586c

32. Acc Chem Res Total Synthesis of Vinblastine, Related Natural Products, and Key Analogues and Development of Inspired Methodology Suitable for the Systematic Study of Their Structure-Function Properties - 2015 Mar. -№17.48 

33. Béatrice Ramus , Omar Benbrahim , Patrick Chérin Use of Intravenous and Subcutaneous Human Immunoglobulins - 2019 Mar.- №64.833:13-18

34. Combination of Decentralized Waste Drying and SSF Techniques for Household Biowaste Minimization and Ethanol Production 2016 Jun;52:353-9. doi: 10.1016/j.wasman.2016.03.047. Epub 2016 Apr 12.

35. Cai H; Caswell J.L., Prescott J.F. "Nonculture Molecular Techniques for Diagnosis of Bacterial Disease in Animals: A Diagnostic Laboratory Perspective". Veterinary Pathology 51 (2), 2014. Pp. 341–350.

36. Christian M Mendez 1, Craig J McClain, Luis S Marsano Albumin Therapy in Clinical Practice PMID: 16207669 DOI: 10.1177/0115426505020003314

37. Cai H; Caswell J.L., Prescott J.F. "Nonculture Molecular Techniques for Diagnosis of Bacterial Disease in Animals: A Diagnostic Laboratory Perspective". Veterinary Pathology 51 (2), 2014. Pp. 341–350.